Ectoparasites from some Myocastor coypus (Molina, 1782) populations (Coypus or Nutria) in Argentina / Ectoparasitas de algumas populações de Myocastor coypus (Molina, 1782) (Coypus ou Nutria) na Argentina

Abstract The occurrence of ectoparasites in wild nutria is poorly understood. Fifty-five livetrapped wild nutria (Myocastor coypus) from its indigenous region were examined for ectoparasites after capture from December 2013 to December 2014. The captures came from the Buenos Aires Province, by far the area of the country most densely populated by nutria, characterized as a temperate grassland, which are prime areas for sustained agriculture. Only one species of chewing lice (Pitrufquenia coypus, Marelli, 1932), one flea (Nosopsyllus fasciatus, Bosc, 1800) and one tick (Rhipicephalus sanguineus, Latreille, 1806) were collected. Fourteen percent of the animals were infested and P.coypus, an obligate parasite of the nutria, which was the most prevalent ectoparasite. N. fasciatus and R. sanguineus occurrence remains controversial as they may or may not be some accidental host species. To our knowledge, this is the first comprehensive and systematic survey of ectoparasites in wild nutria from the southern hemisphere, the indigenous region of this species.

Resumo A ocorrência de ectoparasitas em nutria selvagem é pouco compreendido. Cinquenta e cinco nutria selvagem capturadas (Myocastor coypus) de sua região indígena foram examinados para os ectoparasitas após até captura a partir de dezembro de 2013 a dezembro de 2014. As capturas ocorreram no estado de Buenos Aires, a área mais densamente povoada do país por nutria, caraterizada como uma pastagem temperada, que se tornou área principal para a agricultura sustentável. Uma espécie de piolhos de mastigação (Pitrufquenia coypus, Marelli, 1932), uma pulga (Nosopsyllus fasciatus, Bosc, 1800) e um carrapato (Rhipicephalus sanguineus, Latreille, 1806) foram recolhidos. Catorze por cento dos animais foram infestadas pelo P.coypus, um parasita obrigatório do nutria, sendo o ectoparasita mais prevalente. A ocorrência de N. fasciatus e R. sanguineus continua controversa, pois podem ou não ser algumas espécies hospedeiras acidentais. Para nosso conhecimento, este é o primeiro estudo abrangente e sistemático de ectoparasitas em nutria selvagem do hemisfério sul, a região indígena desta espécie.

Isolation of Leptospira spp. from a man living in a rural area of the Municipality of Cruz Alta, RS, Brazil / Isolamento de Leptospira spp. em um morador da zona rural do Município de Cruz Alta, RS, Brasil

The aim of this study was to describe the isolation of a pathogenic strain of Leptospira interrogans from the urine sample of a male human living in the rural area of the County of Cruz Alta, Rio Grande do Sul. An aliquot of each urine sample was sown in a Fletcher and Ellinghausen - McCullough - Johnson - Harris (EMJH) media. Samples in which there was growth of spirochetes were sent to the Leptospirosis Laboratory of the Institute of Pathobiology in the National Institute of Agricultural Technology, Buenos Aires, Argentina and were typified by the Multiple Locus of Variable Number Tandem Repeat technique (MLVA). Leptospira interrogans serovar Copenhageni strain Fiocruz L1-130 was isolated, and this is a very important finding that serves as a warning to characterize risk situation of leptospirosis epidemic by a pathogenic strain. Health professionals need to be more committed to the primary health care in Brazil and routinely apply actions of preventive medicine in rural communities in order to get success in the control of leptospirosis and other important zoonoses.

O objetivo do presente estudo foi descrever um caso de isolamento de espécie patogênica de Leptospira interrogans em amostra de urina de um humano morador da zona rural do Município de Cruz Alta, Estado do Rio Grande do Sul. De cada amostra de urina, uma alíquota foi semeada nos meios Fletcher e Ellinghausen - McCullough - Johnson - Harris (EMJH). As amostras, nas quais houve crescimento de espiroquetas, foram encaminhadas para o Laboratório de Leptospirose do Instituto de Patobiologia do Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuária, Buenos Aires, Argentina e foram tipificadas pela técnica Multiple Locus of Variable Number Tandem Repeat (MLVA). De um residente do sexo masculino da área rural do município de Cruz Alta, foi isolada Leptospira interrogans sorovariedade Copenhageni cepa Fiocruz L1-130, uma descoberta muito importante e que serve como um alerta por caracterizar uma situação de risco de epidemia de leptospirose por uma cepa patogênica. Os profissionais de saúde precisam ser mais comprometidos com a atenção primária à saúde no Brasil e rotineiramente aplicar ações de medicina preventiva nas comunidades rurais, a fim de obter sucesso no controle da leptospirose e de outras importantes zoonoses.

Fluorescence polarization assay, competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA-C) and indirect ELISA for the diagnosis of brucellosis in buffaloes (Bubalus bubalis) / Teste de polarização fluorescente, teste imunoenzimático competitivo (ELISA-C) e ELISA indireto para o sorodiagnóstico da brucelose em búfalos (Bubalus bubalis)

The objective of the present study was to compare the performance of three serological tests for diagnosis of Brucella abortus infections in buffaloes (Bubalus bubalis). Serum samples collected from 696 adult females were submitted to the competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA-C), (I-ELISA), fluorescence polarization test (FPA), 2-mercaptoethanol test (2-ME) and complement fixation test (CFT). The gold standard was the combination of CFT and 2-ME, considering as positive the reactors in both CFT and 2-ME, and as negative those non-reactors. ROC analyses were done for C-ELISA, I-ELISA and FPA and the Kappa agreement index were also calculated. The best combinations of relative sensitivity (SEr) and relative specificity (SPr) and Kappa were given by C-ELISA (96.9%, 99.1%, and 0.932, respectively) and FPA (92.2%, 97.6 and 0.836, respectively). The C-ELISA and FPA were the most promising confirmatory tests for the serological diagnosis of brucellosis in buffaloes, and for these tests, cut-off values for buffaloes may be the same as those used for bovines.

O presente estudo objetivou comparar o desempenho de três testes para o sorodiagnóstico da Brucella abortus em búfalos (Bubalus bubalis). Soros de 696 fêmeas bubalinas adultas foram submetidos aos testes: teste imunoenzimático indireto (ELISA-I), teste imunoenzimático competitivo (ELISA-C), teste de polarização fluorescente (TPF), 2-mercaptoetanol (2-ME) e teste de fixação do complemento (FC). Foi empregada, como gold standard, a combinação de dois testes, FC e 2-ME. A curva ROC foi construída para os três testes: ELISA-I, ELISA-C e PF e, com base nos resultados desta análise, foi calculado o índice de concordância Kappa para cada teste. As melhores combinações de sensibilidade (Sr) e especificidade (Er) e os melhores resultados de Kappa foram alcançados pelo ELISA-C (96,9%, 99,1% e 0,932, respectivamente), seguido pelo PF (92,2%, 97,6%, e 0,836, respectivamente). Concluiu-se que os resultados dos estudos com os testes ELISA-C e PF em bovinos podem ser inferidos para búfalos com razoável segurança e que ambos demonstraram ser testes confirmatórios promissores para a espécie estudada.

Diagnosis of canine leptospirosis using an immunomagnetic separation-PCR method

Diagnosis of leptospirosis by PCR is hampered due to the presence of substances on biological fluids. Here, we report an immunomagnetic separation step prior to PCR which improved the detection of Leptospira spp. in blood and urine samples from dogs. It resulted in a significant improvement on sensitivity for diagnosis of canine leptospirosis.

Validação interlaboratorial do teste de polarização fluorescente para o diagnóstico sorológico da brucelose bovina / Interlaboratorial validation of the fluorescence polarization assay for the serodiagnosis of bovine brucellosis

Esta investigação teve por objetivo validar o teste de polarização fluorescente (TPF) para o diagnóstico sorológico da brucelose bovina, determinando a sensibilidade (SE) e a especificidade relativas (SP) e verificando a reprodutibilidade do teste em quatro laboratórios no Brasil. Foram selecionadas 1.389 amostras de soro sanguíneo, as quais foram inicialmente submetidas aos testes do antígeno acidificado tamponado (AAT) e mercaptoetanol (2-ME). As mesmas amostras foram submetidas à reação de fixação de complemento (RFC) e ao TPF. Para a avaliação do TPF, foi adotada a combinação dos resultados do AAT, da RFC e do 2-ME, utilizados como população de referência (padrão-ouro). Para a determinação do ponto de corte do TPF que proporciona a melhor combinação de sensibilidade e especificidade, foi usada a análise TG-ROC. A concordância entre os resultados dos quatro laboratórios foi determinada com base no indicador kappa e no coeficiente de correlação de Pearson. Os pontos de corte do TPF situaram-se entre 85,2 e 93,6 mP, conforme o laboratório. A sensibilidade variou de 91,7 a 97,3 por cento, e a especificidade situou-se na faixa de 82,6 a 98,3 por cento. Na comparação entre os resultados do TPF dos quatro laboratórios, o indicador kappa ficou entre 0,69 e 0,95, o que indica, na maioria das situações, reprodutibilidade excelente, e o coeficiente de correlação variou entre 0,76 e 0,99. Os resultados indicaram que o TPF apresentou bom desempenho, na maioria das situações, com sensibilidade e especificidade elevadas. Em comparação com os testes convencionais, o TPF apresenta as vantagens de ser de execução mais rápida e mais fácil e não estar sujeito à ocorrência de prozona, como a RFC e o 2-ME, nem de atividade anticomplementar, como a RFC.

The purpose of this research was the interlaboratorial validation of the polarization fluorescence assay (PFA) for the serodiagnosis of bovine brucellosis, verifying the relative sensitivity, the relative specificity and the reproducibility of the test in four Brazilian laboratories. Serum samples from 1,389 bovines were selected and submitted to the rose Bengal (RBT) and 2-mercaptoethanol tests in one of the laboratories. The same samples were tested by the complement fixation (CFT) test and by the PFA in the four laboratories participating of the research. The reference population (golden standard) used to evaluate the PFA was the combination of the results of RBT, CFT and 2-ME. TG-ROC analysis was used to obtain the cut-off that provided the best combination of sensitivity and specificity. The agreement between laboratories was obtained by the kappa statistic and Pearson correlation coefficient (r). The PFA cut-off values were from 85.2 to 93.6. The sensitivity of the PFA assay varied from 91.7 percent to 97.3 percent, and the specificity values varied from 82.6 percent to 98.3 percent. When comparing PFA results from the four laboratories, the kappa values was between 0.69 and 0.95, which indicates, in most situations, excellent reproducibility, and the correlation coefficient varied from 0.76 to 0.99. The results showed that the PFA had a good performance, with high sensitivity and specificity. Compared to the conventional tests, the PFA has the advantages of being easy and quick to perform, and it is not prone to the occurrence of prozone, as the CFT or the 2-ME, nor to the occurrence of anti-complementary effect, as the CFT.